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食醋的固态发酵

米粉液化糖化

食醋固态发酵参考文献[17]。按照1:2(g:mL)的料水比将大米粉调成浆液，用碳酸钠调节浆液pH值为6.4±0.1。按照100 U/g大米粉添加α-淀粉酶，90 ℃保温液化20 min，然后降温至(59±1) ℃。用浓H2SO4调节pH值到4.5±0.1，农业解淀粉芽孢***价格，按照100 U/g大米粉添加糖化酶，60 ℃保温糖化4 h，糖化完成后，农业解淀粉芽孢***生产，降温至(36±1) ℃，即为糖化液。

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菌株的鉴定：对筛选得到的乳酸菌进行16S rDNA序列分析，确定其种属。将活化好的菌液，进行菌株的全***组脱氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid， DNA)的提取[16]，然后对***组DNA的16S rDNA区域进行PCR扩增，上游引物27F序列5′-AGAGTTTGATCCTGGCCTCA-3′，下游引物1492R序列：5′-GGTTACCTTGTTACGACTT-3′，扩增片段为1 500 bp。PCR体系50 μL：10×buffer 5 μL；脱氧核糖核苷酸三磷酸(deoxy-ribonucleoside triphosphate， dNTP) 5 μL；上游引物(25 μmol/L)0.5 μL；下游引物(25 μmol/L)0.5 μL；Taq DNA 聚合酶(250 U)0.5 μL；模板DNA 1.5 μL ；ddH2O 37 μL。PCR扩增条件为：95 ℃ 3 min；95 ℃ 10 s；55 ℃ 30 s；72 ℃ 1 min；72 ℃ 5 min，2～4反应步骤进行30个循环。扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳检测其纯度及浓度，将达到测序要求的扩增产物送至上海华大***进行测序，将测序结果在美国国立生物技术信息中心(national center for biotechnology information， NCBI)上BLAST进行比对，并确定其种属。